Leon Bhagawanta Cahyono, S.T.P.

Nama: Leon Bhagawanta Cahyono
NIM: 16/400530/TP/11743
Program Studi: S1 Teknologi Pangan dan Hasil Pertanian
Email: leon.b@mail.ugm.ac.id
LinkedIn: https://www.linkedin.com/in/leonbhagawantacahyono/
Judul Skripsi: Ekspresi Enzim Alfa Amilase Termostabil dari Brevibacillus sp. dengan Sel Inang Escherichia coli BL21(DE3)
Final Project Title: Thermostable Alpha Amylase Enzyme Expression from Brevibacillus sp. Using Escherichia coli BL21(DE3) Host
Deskripsi: Enzim alfa amilase merupakan salah satu enzim yang memiliki aplikasi luas dalam industi pangan, salah satunya likuifikasi pati untuk memproduksi gula sederhana. Dalam proses likuifikasi pada suhu tinggi (90-100ºC) dibutuhkan enzim yang bersifat termostabil. Salah satu sumber enzim termostabil yaitu bakteri termofilik Brevibacillus sp. yang berasal dari kawah Sikidang Dieng. Penelitian sebelumnya telah berhasil untuk melakukan kloning gen penyandi alfa amilase termostabil dari bakteri Brevibacillus sp. Penelitian ini bertujuan untuk mengekspresikan plasmid rekombinan pET-SUMO Amy A25 menggunakan Eschericha coli (E. coli) BL21(DE3) untuk memproduksi enzim alfa amilase termostabil. Tahapan penelitian yang dilakukan adalah transformasi plasmid rekombinan berisi gen penyandi alfa amilase termostabil ke dalam sel kompeten E coli BL21(DE3). Setelahnya, dilakukan analisis transforman dengan metode koloni PCR dan sequencing untuk mengetahui sekuen dari fragmen DNA dan orientasinya. Selanjutnya koloni E. coli BL21(DE3) positif yang mengandung insert pET-SUMO Amy A25 dilakukan optimasi ekspresi pada suhu 18ºC dan 37ºC dengan variasi waktu. Hasil optimasi kemudian dianalisis dengan menggunakan metode Sodium Dodecyl Sulfate-Polycarylamide Gel Electrophresys (SDS-PAGE). Suhu optimum dari enzim alfa amilase termostabil dapat diketahui dengan melakukan uji aktivitas amilase dengan metode Dinitrosalisilat (DNS) pada berbagai suhu. Hasil dari penelitian ini adalah bahwa plasmid rekombinan pET-SUMO Amy A25 dapat diekspresikan dengan E. coli BL21(DE3) untuk memproduksi enzim alfa amilase termostabil. Enzim alfa amilase termostabil tersebut memiliki suhu optimum yaitu 70ºC.